細胞培養を行う際によく使われるのがEDTA-PBSです。
本サイトでは1 mM EDTA-PBS を紹介いたしますが、一般的には0.02% EDTA-PBSも多い気がします。
0.02% EDTAは濃度にすると大体0.5 mMほどになります。
1 mM EDTAを紹介するのは、以前紹介した0.5 M EDTAがそのまま使えるからです。
普段は、これにトリプシンを加えることが多いと思いますが、今回はそれを除いております。
トリプシン処理を行う前にEDTA-PBSのみで処理もしくはwashに使う方もいると思い書きました。
トリプシン含有に関しては、また次の機会に。。。
[Material]
| 1mM EDTA / PBSの調整 | ||
| 試薬もしくは溶液 | 使用量(500 mL) | 最終濃度 |
| 0.5 M EDTA溶液* | 1 mL | 1 mM |
| 10x PBS(-) | 50mL | 1x PBS(-) |
*一般的な0.02% EDTAを作製したい場合は2% EDTA/PBSを作製しておき、これを100倍希釈で加えるようにする(以下の表を参考にしてください)。
| 0.02% EDTA / PBSの調整 | ||
| 試薬もしくは溶液 | 使用量(500 mL) | 最終濃度 |
| 2% EDTA/PBS | 5 mL | 0.02% |
| 1x PBS(-) | 495 | – |
[Method]
1. 0.5M EDTAおよび10xPBSを混ぜる。
2. 水で500 mLまでメスアップを行う。
3. オートクレーブして、室温にて保管。
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参考文献
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