0.5M EDTA (pH8.0)の調整

　　　　　　　　　EDTA(wikipediaより転載)

0.5M EDTA溶液を予め作製しておくと、便利です。

例えば、TAEの作製なんかでも使いますので、是非作っておきましょう。

EDTAとはエチレンジアミン四酢酸(wikipedia)で、いわゆるキレート剤(wikipedia)です。

生化学の実験においては重金属をキレートするためとか、酵素を不活化させるためとかに使われております。
また、培養上皮細胞にEDTA処理をするとCaでくっついているカドヘリンがほどけてしまいます。

実生活ではシャンプーも挙げられるそうです。

では、以下に調整方法を示します。

[Materials]

1. 800 mLの超純水にEDTAの粉末をゆっくり加えスターラーで撹拌する。
2. 固形化NaOHだんだんと加えて、EDTAを溶かす(pHの上昇に伴い溶けて行く)。
3. EDTAが溶けきったら、水酸化ナトリウム溶液でpHを8.0にし、1Lまでメスアップする。
4. オートクレーブして常温保存。

実際の実験では0.1~6mMの濃度で使用することが多いです。
なので、この作製した溶液は完全なストック溶液となります。1Lも作製する必要がなければ、200 mLであったり500 mL であったり各自調節をしてください。
また本プロトコールではEDTA 2Na 2H₂0を使用しておりますが、EDTAはNa塩が異なるものも売られています。別のものを使う際には分子量の計算をし直すとともに、追加するNaOHの量も調整してください。
EDTAは各種金属イオンとキレート結合をしますが、そのキレートの効果は溶液中のpH濃度に依存します。なのでpHを必要以上に高くしてしまうと、よくありません。

EDTAはキレート剤の万能薬である一方で、EGTAのようにカルシウムイオン選択的にキレートするものもあります。

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参考文献

・	Wikipedia contributors. “エチレンジアミン四酢酸.” Wikipedia. Wikipedia, 22 Jan. 2012. Web. 12 Feb. 2012.
・	EDTA類の違い, 同仁科学研究所
・	バイオ実験イラストレイテッド〈1〉分子生物学実験の基礎 (細胞工学別冊 目で見る実験ノートシリーズ) 中山 広樹,西方 敬人秀潤社 Amazonで詳しく見る
・	バイオ試薬調製ポケットマニュアル―欲しい溶液・試薬がすぐつくれるデータと基本操作 田村 隆明羊土社 Amazonで詳しく見る