7.5M 酢酸アンモニウム(NH4OAc)の調整

7.5M 酢酸アンモニウム(ammonium acetate)の作製方法です。

エタノール沈殿の際に、塩として酢酸アンモニウムを加えます。

同様によく扱われる、酢酸ナトリウムと比べると、

dNTPへの溶解度が高いため、dNTPの除去に有為に働きます。

一方で、T4ポリヌクレオチドキナーゼや、

一部の制限酵素、DNAリガーゼなどを阻害してしまいます。

総じて、汎用性が高いのは酢酸ナトリウムでしょう。

また、オートクレーブにはできない試薬のため、

滅菌を行なうにはフィルター滅菌を使うことが求められます。

wikipediaより転載

[Materials]

・酢酸アンモニウム( CH₃COONH₄, NH₄OAc ) 　MW=77.08

*10Mで作製する場合もあり、その際には100 mLだと77g必要になる

[Method]

1. 超純水 60mLをビーカーに入れてスターラーでまわしながら、  57.8 gのNH₄OAcを測りとり、加えていく

2. 100 mLまでメスアップする

3. フィルター滅菌

4. フタをしっかりと閉めて、4℃冷蔵庫もしくは-20℃冷凍庫にて保存

参考文献

・	Wikipedia contributors. “酢酸アンモニウム.” Wikipedia. Wikipedia, 1 Apr. 2013. Web. 26 May. 2013.
・	バイオ実験イラストレイテッド〈1〉分子生物学実験の基礎 (細胞工学別冊 目で見る実験ノートシリーズ) 中山 広樹,西方 敬人秀潤社 Amazonで詳しく見る
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