Standard Saline Citrate (SSC) の作製方法について紹介します。
主にサザンブロッティングに用いられる溶液で、
ハイブリダイゼーションやトランスファー、洗浄液に至るまで、
濃度を変えながら使用します。
なので20 xとはいっても1 x にして使用するとは限らないのがSSC溶液です。
クエン酸が溶液中には入っているのは、クエン酸が入ることでDNAがキレートされ安定化するためです。
クエン酸ナトリウム(Wikipediaより転載)
また、似た溶液にSSPE溶液というものがありますが、EDTAを使うことでキレート効果が高くなっているそうです。
こちらについてはまた機会があるときに紹介いたします。
[Material]
・塩化ナトリウム(NaCl) MW=58.44
・クエン酸三ナトリウム二水和物(C6H5Na3O7.2H2O, Trisodium citrate dihydrate) MW=294.10
20xSSCの調整 | |||
試薬 | 使用量(1L) | 使用量(500 mL) | 最終濃度 |
NaCl | 175.32 g | 87.66 g | 3 M |
C6H5Na3O7.2H2O | 88.23 g | 44.11 g | 0.3 M |
(1 N) HCl | 適量 | 適量 | |
超純水 | <1 L | < 500 mL |
[Method]
1. 試薬を水(8割の量ぐらい)で溶かし、1N HClを用いてpHを7.0になるよう調整する。
2. 水で目標量までメスアップをする。
3. 長期保存の場合にはオートクレーブ。
4. 室温もしくは冷蔵庫にて保存。
参考文献
・ | 一般試薬の調整, 生命科学支援セクター 植物機能ゲノミクス部門, 三重大学 | ||
・ | Wikipedia contributors. “クエン酸ナトリウム.” Wikipedia. Wikipedia, 9 Sep. 2012. Web. 9 Feb. 2013. | ||
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・ | 各種溶液の調整, ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社 | ||
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